根據TBGREENTMpREMIxExTAQTMⅡ試劑盒說明書進行反應，复方每個樣品的中草目的基因和內參基因分別進行擴增，每樣3個重複。药对疫相因m影响反應體係共20μL：CdNA樣2μL；uNIvERsdlsyBRGREEN100μL；上、肉鸡然免下遊引物各1.5μL；FREEWATER5μL。生长擴增條件的及天程序設置：98℃2MIN；95℃100s，60℃45s循環40次；90℃90s；60℃3MIN；94℃100s。关基PCR反應結束後，复方使用PCR儀自帶的中草AB17300sdssoFTｗARE分析軟件分析所得結果CT值。目的药对疫相因m影响基因的mRNA相對表達量用2－△△CT計算，最終結果以GRApHpAdpRIsM5軟件作圖表示。肉鸡然免
試驗數據均用ExCE12013軟件進行整理，生长采用spss22.0軟件進行單因素方差分析，及天差異顯著時用duNCAN氏進行多重比較，关基P＜0.05為差異顯著性判斷標準。复方
由表3可見，試驗前期（0～21d），B組肉雞平均日采食量顯著高於A組和F組（P＜0.05），且其平均日增質量顯著高於除C組和E組外的其他各組（P＜0.05）。試驗後期（22～42d），C組肉雞平均日采食量和平均日增質量均顯著高於A組和E組（P＜0.05），B組肉雞平均日增質量顯著高於A組、E組和F組（P＜0.05）。從全期（0～42d）看，各處理組肉雞平均日采食量無顯著性差異（P＞0.05），但B組肉雞平均日增質量顯著高於A組、d組和F組（P＜0.05），且C組、E組、G組肉雞平均日增質量顯著高於A組（P＜0.05），而A組肉雞料質量比顯著高於B組、C組和E組（P＜0.05），B組肉雞料質量比顯著低於d組和F組（P＜0.05）。
如表4所示，對於胸腺指數而言，B組顯著高於C組和E組外的其他各組（P＜0.05），而C組和E組顯著高於A組（P＜0.05）。B組脾髒指數也顯著高於除C組和E組的其他各組（P＜0.05），而C組、E組和G組均顯著高於A組（P＜0.05）。各組間法氏囊指數均無顯著性差異（P＞0.05）。
結果如圖1所示，與對照組相比，試驗組肉雞血液中IL-2、IL-6、IL-8、TLR3、TLR4基因的mRNA在試驗期內均有上升趨勢，而IL-100呈下降趨勢。試驗組IL-2、IL-8、TLR3、TLR4基因的mRNA在試驗期內均顯著高於對照組（P＜0.05），整體呈上升趨勢；IL-6mRNA在28d和35d時顯著高於對照組（P＜0.05），呈上升趨勢；而試驗組IL-100mRNA在28d和42d時均顯著低於對照組（P＜0.05），呈下降趨勢。總體來看，在飼糧中持續添加複方中草藥可顯著提高肉雞血液中IL-2、IL-6、IL-8、TLR3、TLR4mRNA表達量（P＜0.05），並顯著降低血液IL-100mRNA的表達豐度（P＜0.05）。
飼糧中添加複方中草藥能有效提升肉雞生產性能已被國內外多數試驗所證實，多數養殖場接受並通過中草藥添加劑來提升肉雞生產性能。本試驗前期結果顯示，B組平均日增質量與平均日采食量均顯著高於其他各組，再次證實了抗生素提高肉雞生長性能的效果。後期B組平均日增質量和平均日采食量與C組、d組和G組均無顯著性差異，表明飼糧添加複方中草藥與添加抗生素對肉仔雞的生長促進效果一致。全期結果顯示各組平均日采食量均無顯著差異，平均日增質量結果B組、C組、E組優於其餘各組，但料質量比C組最低，其結果表明C組添加效果優於B組。唐日益等研究複方中草藥添加劑（HMA）對蛋雞生產性能和蛋品質的影響，分別以連續和隔周在基礎飼糧中添加2kg/THMA為試驗組，結果顯示複方中草藥添加劑對生產性能和蛋品質均有改善作用，且連續飼喂複方中草藥添加劑效果較好，本試驗結果與其相似。劉硯涵等研究中草藥飼料添加劑對‘北京鴨’生產性能、免疫指標及肉品質的影響，在基礎飼糧中分別添加0.1％（低劑量組）、0.2％（中劑量組）及0.5％（高劑量組）的複方中草藥，發現複方中草藥顯著提高北京鴨生長性能、屠宰性能，尤以0.2％的中草藥添加量效果最好。本試驗E組與G組各項生長性能檢測指標均無顯著差異，說明低劑量添加就可達到高劑量的添加效果。對於複方中草藥的配伍及添加量還需更多有力數據支撐，複方中草藥添加效果是否優於抗生素還需後續試驗進行考證。
禽類的免疫器官主要有法氏囊、胸腺和脾髒，其中法氏囊和胸腺是禽類的中樞免疫器官，脾髒是禽類的次級免疫器官。免疫器官的發育狀態和功能直接決定著家禽的免疫水平，其良好的發育能有效降低肉雞的發病率，減少藥物的使用，保證肉製品的質量和安全。女貞子所含的路類及苯芒醇巧類物質具有補肝補腎、清虛熱的作用；板藍根當中所含有的黃酬類和三瞄皂巧類生物活性物質具有清熱解毒的作用；當歸中含有的當歸多糖和揮發油具有補血活血、潤燥滑腸作用；柴胡中所含的皂苷能抑製各種炎症因子引起的踝關節腫脹和結締組織增生性炎症。將其加入肉雞基礎飼糧，可有效改善肉雞免疫器官的發育。蔡晴霞等比較4種複方中藥添加劑對肉雞生產性能與免疫性能的影響，4個試驗組以拌料法和飲水法給藥，測定不同日齡肉雞免疫器官指數，結果顯示複方中藥2組可提高脾髒指數和胸腺指數，其結果與本試驗結果基本一致。楊潤霞等研究3種中藥複方製劑對雛雞免疫器官發育及免疫功能的影響，以黃芪、白術、防風等單味中藥組成3組中藥複方中草藥製劑，分別於42、52、62日齡對試驗雞進行檢測，結果顯示，試驗組雛雞胸腺、法氏囊發育良好，無明顯衰老症狀。其結果與本試驗存在差異，可能與中草藥配方、基礎飼糧組成及營養水平、飼養環境不同等因素密切相關。總體而言，複方中草藥對肉雞免疫器官的發育有促進作用。
IL-2又稱T細胞生長因子，可以激活T細胞，促進B細胞增殖和抗體分泌以及巨噬細胞的活化。IL-6主要能刺激活化的B細胞增殖和分泌抗體，刺激肝細胞合成急性期蛋白並參與炎症反應，促進血細胞的發育。IL-8的主要生物學活性是吸引和激活中性粒細胞。中性粒細胞與IL-8接觸後發生形態變化，遷移到反應部位，釋放出一係列活性產物。這些作用可導致機體局部炎症，達到殺菌和細胞損傷的目的。IL-100可通過活化的T細胞抑製細胞因子的產生，因此被稱為細胞因子合成抑製劑（CyTokINEsyNTHEsIsINHIBIToR，CsIF），特別是通過TH1細胞抑製IL-2、IFN-、LT等細胞因子的產生，從而抑製細胞免疫應答。TLR3信號通路可促進炎性因子的產生，在宿主抵抗活性病毒中發揮重要作用。TLR4受體在多種細胞中均有表達，例如單核巨噬細胞、中性粒細胞等。TLR可識別病毒囊膜蛋白，然後與病原分子結合，從而啟動機體免疫係統，最終引起趨化因子和炎症因子的表達而發揮抗感染作用。寡糖、植物精油和微生態製劑可調節肉雞體內部分基因IL及TLRsmRNA的表達已被多位學者早期證實，但目前關於複方中草藥對肉雞天然免疫相關基因表達的影響報道較少。馬景番等探討不結球白菜提取物（NCCE）對肉雞脾髒細胞因子mRNA表達豐度的影響，分別在基礎飼糧中添加不同劑量的NCCE，結果顯示，與對照組相比，NCCE能夠誘導肉雞脾髒IL-2、IL-4及IFNγmRNA的表達，以添加500MG/kg效果最好。熊阿玲等探討不同水平的MOS對肉雞生長性能等的影響，天然免疫相關基因表達檢測結果顯示，飼糧添加MOS顯著影響肉雞組織TLR2和TLR4mRNA的表達。本試驗在基礎飼糧中持續添加複方中草藥，肉雞血液中IL-2、IL-6、IL-8、TLR3和TLR4基因mRNA的表達量顯著高於對照組，並在試驗期內呈顯著上升趨勢，且IL-100mRNA表達顯著下降，進一步說明了中草藥製劑也同樣具有增強免疫的功效。
本試驗條件下，飼糧添加複方中草藥可提高肉雞生產性能、促進免疫器官的發育，且在14～42日齡添加100mL/kg複方中藥製劑提取物效果最佳；持續添加複方中藥製劑提取物可上調基因IL-2、IL-6、IL-8、TLR3、TLR4mRNA的表達，下調IL100mRNA的表達。
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