沙棘為胡頹子科酸刺屬的沙棘灌木或小喬木。因抗寒抗旱、甾醇作用耐鹽堿、对大豆油耐瘠薄、和猪生態適應性廣的油抗氧化特點,作為防風固沙、沙棘保持水土的甾醇作用“生態保護先鋒樹種”在我國被大麵積種植,總麵積達1800萬畝,对大豆油占世界沙棘麵積的和猪90%以上。沙棘是油抗氧化藥食兩用植物,具“活血散瘀、沙棘化痰寬胸、甾醇作用補脾健胃、对大豆油生津止渴、和猪清熱止瀉”之功效。油抗氧化沙棘甾醇是從沙棘果實中提取的一類天然甾體化合物,是植物生長過程中的重要次生代謝產物,被譽為“生命的鑰匙”和“血管的清道夫”,具有抗氧化、降低血脂、免疫調節、消炎退熱等功能,在醫藥、保健和食品領域具有廣闊的發展空間。目前,對沙棘甾醇的研究僅限於製備工藝、成分鑒定和部分藥理活性研究,對油脂抗氧化作用未見報道。本研究旨在探討沙棘甾醇對油脂的抗氧化作用,為其作為一種天然、綠色、保健的食品抗氧化劑提供實驗依據。
一、實驗材料與方法
1、材料與試劑
沙棘甾醇:沙棘籽油購自青海省清華博眾生物科技有限公司,采用皂化法提取粗甾醇,無水乙醇反複重結晶得純化甾醇(經硫磷鐵法測定,總甾醇含量為84.5%),40℃烘幹作為實驗藥物;維生素C:純度>99%,麥克林公司;維生素E:純度>97%,麥克林公司;胡蘿卜素:純度>96%,麥克林公司;二丁基羥基甲苯(BHT):純度>97%,北京索萊寶公司;大豆油:益海嘉裏食品有限公司;豬油:華聯超市購買新鮮豬板油,自製;冰乙酸、三氯甲烷:天津市富宇精細化工有限公司;可溶性澱粉、碘化鉀:上海光諾化學科技有限公司;硫代硫酸鈉標準液:北京海岸鴻蒙標準物質技術有限責任公司。
2、儀器與設備
SQP電子分析天平:賽多利斯科學儀器有限公司;電熱鼓風幹燥箱:上海一恒科學儀器有限公司;KQ5200v型超聲波清洗器:昆山超聲波有限公司。
3、方法
(1)沙棘甾醇不同添加量對油脂抗氧化作用
精密稱取一定量的沙棘甾醇用無水乙醇溶解,按油脂質量百分比0.01%、0.02%、0.05%、0.10%和0.20%的比例分別加入到裝有80g大豆油和豬油的棕色廣口瓶中作為供試油樣,超聲加攪拌混勻(超聲溫度50℃,超聲時間10min),以不添加沙棘甾醇的油脂做空白對照。采用Schaal烘箱貯藏實驗,將所有樣品敞口置於[(65±1)℃]恒溫鼓風幹燥箱中強化貯存,每12~14h超聲(超聲溫度50℃)加攪拌混勻10min並交換它們在恒溫箱中的位置,每4天每個油樣平行測定3次,(結果誤差≥5%,再平行取樣3次),測定過氧化值方法依據GB5009227-2016《食品中過氧化值的測定》的規定,油脂抑製率=(不添加抗氧化劑油樣的POV值-添加抗氧化劑油樣的POV值)/不添加抗氧化劑油樣的POV值*100%。
(2)沙棘甾醇與不同抗氧化劑對油脂抗氧化作用比較研究
精密稱取一定量的沙棘甾醇、維生素C、維生素E、BHT和β-胡蘿卜素用無水乙醇溶解,按油脂質量百分比0.02%分別加入到裝有80g大豆油和豬油的棕色廣口瓶作為供試油樣,超聲加攪拌混勻(超聲溫度50℃,超聲時間10min),以不添加抗氧化劑的油脂做對照。精密稱取一定量的沙棘甾醇用無水乙醇溶解,按油脂質量百分比0.01%、0.02%、0.05%、0.10%和0.20%的比例分別加入到裝有80g大豆油和豬油的棕色廣口瓶中作為供試油樣,超聲加攪拌混勻(超聲溫度50℃,超聲時間10min),以不添加沙棘甾醇的油脂做空白對照。采用Schaal烘箱貯藏實驗,將所有樣品敞口置於[(65±1)℃]恒溫鼓風幹燥箱中強化貯存,每12~14h超聲(超聲溫度50℃)加攪拌混勻10min並交換它們在恒溫箱中的位置,每4天每個油樣平行測定3次,(結果誤差≥5%,再平行取樣3次),測定過氧化值方法依據GB5009227-2016《食品中過氧化值的測定》的規定,油脂抑製率=(不添加抗氧化劑油樣的POV值-添加抗氧化劑油樣的POV值)/不添加抗氧化劑油樣的POV值*100%。
(3)沙棘甾醇分別與維生素C、BHT複配對油脂抗氧化作用研究
精密稱取一定量的沙棘甾醇、維生素C和BHT,以2:1、1:1、1:2比例複配,把複配抗氧化劑用無水乙醇溶解,按油脂質量百分比0.02%分別加入到裝有80g大豆油和豬油的棕色廣口瓶中作為供試油樣,超聲加攪拌混勻(超聲溫度50℃,超聲時間10min),以不添加抗氧化劑的油脂做對照。精密稱取一定量的沙棘甾醇用無水乙醇溶解,按油脂質量百分比0.01%、0.02%、0.05%、0.10%和0.20%的比例分別加入到裝有80g大豆油和豬油的棕色廣口瓶中作為供試油樣,超聲加攪拌混勻(超聲溫度50℃,超聲時間10min),以不添加沙棘甾醇的油脂做空白對照。采用Schaal烘箱貯藏實驗,將所有樣品敞口置於[(65±1)℃]恒溫鼓風幹燥箱中強化貯存,每12~14h超聲(超聲溫度50℃)加攪拌混勻10min並交換它們在恒溫箱中的位置,每4天每個油樣平行測定3次,(結果誤差≥5%,再平行取樣3次),測定過氧化值方法依據GB5009227-2016《食品中過氧化值的測定》的規定,油脂抑製率=(不添加抗氧化劑油樣的POV值-添加抗氧化劑油樣的POV值)/不添加抗氧化劑油樣的POV值*100%。
(4)統計學方法
所有實驗數據均重複測定3次,采用SPSS19.0軟件進行統計學分析,檢測結果以±S表達,組間比較采用單因素方差分析,視P<0.05為差異有統計學意義。
二、結果與分析
1、沙棘甾醇不同添加量對大豆油和豬油抗氧化作用
表1~2顯示,從0天到24天,所有供試油樣POV值逐步升高,尤其空白油樣顯著升高,而添加沙棘甾醇的油樣則增加緩慢,表明沙棘甾醇對大豆油和豬油的氧化均具有不同程度的抑製作用。0.01%、0.02%、0.05%、0.10%和0.20%沙棘甾醇對第24天大豆油氧化的抑製率分別為6.56%、10.17%、15.10%、18.01%和21.23%,對第24天豬油氧化的抑製率分別為7.12%、9.17%、21.70%、29.42%和33.43%,說明隨著沙棘甾醇劑量的增加其抗氧化強度逐步增加,呈正相關的劑量依賴效應。對豬油的抗氧化效果優於大豆油,對豬油氧化的抑製率約為大豆油的1.4~1.6倍,這種特性可能與所含的脂肪酸種類不同有關,大豆油中飽和脂肪酸為19.23%,不飽和脂肪酸為80.77%,而豬油中飽和脂肪酸為49.57%,不飽和脂肪酸為50.43%,大豆油中不飽和脂肪酸含量遠遠高於豬油中的含量,造成大豆油更易被氧化變質。
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